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干货!加州鲈诺卡氏菌病困扰你已久?一线渔医教你确诊和防治

2018-11-1 20:49| 发布者: 一片云| 查看: 39237| 评论: 0|来自: 山东11选5频道

摘要: 山东11选5频道原创报道,认识诺卡氏菌病,是每一位加州鲈养殖户必备的基本功。能侵害鱼类的诺卡氏菌主要有3种,分别为星状诺卡氏菌(N.asteroides)、鰤鱼诺卡氏菌(N.seriolae)和杀鲑诺卡氏菌(N.salmonicida)。但据相关 ...
  山东11选5频道原创报道,认识诺卡氏菌病,是每一位加州鲈养殖户必备的基本功。

  文/图 顺德活宝源生物科技有限公司 梁芝源 胡雄 王婷婷

  一、病原—鰤鱼诺卡氏菌

  能侵害鱼类的诺卡氏菌主要有3种,分别为星状诺卡氏菌(N.asteroides)、鰤鱼诺卡氏菌(N.seriolae)和杀鲑诺卡氏菌(N.salmonicida)。但据相关文献和我们的检测,从珠三角地区养殖加州鲈分离到的所有诺卡氏菌均为鰤鱼诺卡氏菌(N.seriolae)。

  1、革兰氏阳性菌,适温25——28℃

  鰤鱼诺卡氏菌,为一种革兰氏阳性菌,隶属细菌届、放线菌门、放线菌纲、放线菌目、诺卡氏菌科。该菌以腐生为主,专性需氧,具有弱抗酸性,无运动性,最适温度25——28℃,最适盐度0——1.0%,适宜pH范围5.8——8.5,最适pH为6.5——7.0。

  2、菌丝呈分枝杆状,血平板中生长快

  鰤鱼诺卡氏菌的菌丝呈杆状、分枝,长约2——5μm,在宿主病灶处相互交错、聚集成团(光学显微镜放大400倍清晰可见)。该菌能在血琼脂平板、营养琼脂培养基、脑心浸液琼脂培养基等多种培养基中生长,其中,在血平板中生长相对较快,2——5天即可长出明显菌落;而在脑心浸液琼脂培养基生长较慢,需4——10天才能长出明显菌落;菌落呈白色或淡黄色,砂粒状,粗糙,边缘不整齐,有时表面凸起形成褶皱。

  3、对氟苯尼考、强力霉素等相对敏感

  据相关研究,鰤鱼诺卡氏菌具有多种表型和基因型,其分型与地域差异与宿主关系不大。Ismail等研究发现,α-葡萄糖苷酶阳性菌株对盐酸土霉素有抗性,对红霉素敏感;而α-葡萄糖苷酶阴性菌株对盐酸土霉素敏感,绝大部分(97.9%)对红霉素有抗性。据我们实验室内部试验,分离到的菌株均对氟苯尼考、强力霉素等相对敏感。

  二、流行特点

  1、4——11月份流行,15——32℃均可发病

  从发病季节看,珠三角地区每年4——11月流行,水温15——32℃均可发病。其中,一龄鱼以10——11月份发病最为严重,二龄鱼以4——5月份最为严重;其他月份(12月——次年2月),诺卡氏菌病为潜伏状态,一般不会发病死鱼,但如果气温持续偏暖,也可引起持续少量死鱼。

  2、规格大于22cm易发病

  从发病规格看,经我们确诊的、自然感染诺卡氏菌病的加州鲈最小规格为全长22cm。大于此规格的加州鲈,均易感染诺卡氏菌病;而小于此规格的加州鲈,尽管也有部分病鱼会出现类似诺卡氏菌病的常见症状如肝脏白斑等,但此类病鱼观察不到疑似诺卡氏菌菌丝,也分离、培养不到疑似致病菌。

  3、杀虫、换水后发病率高,易复发

  从发病规律看,在流行季节,易感规格的加州鲈均可发病,在杀虫、换水、过度投喂等节点后发病率极高。一旦发病,即使彻底治愈,也容易复发;而且,一旦当年发病,如果不彻底清塘,来年也发病的概率超过90%。

  三、病症

  据相关文献,鰤鱼诺卡氏菌病的主要病理变化为内脏形成黄色或白色结节。但是,据我们检测,诺卡氏菌病表现的症状十分复杂,不断有新的病症出现(如浅表性溃疡,创口鲜红);另一方面,也有一些疾病表现出与诺卡氏菌病类似的症状(如苗期肝脏白斑等)。

  1、活动状态:病鱼常见体色偏黑,迟钝,乏力,浮游于水面。但也有部分病鱼活力较强。

  2、体表:病鱼体表常形成斑点状出血,浓疮,或者浅表性溃烂(患处鲜红)。有时体表完好,并无异常。

  3、口腔:少数病鱼口腔可见溃疡斑。

  4、眼睛:部分严重感染的病鱼可见眼睛膨大凸起。

  5、鳃:部分病鱼鳃丝有大量白色结节,尤以秋冬季常见;但也有部分病鱼鳃丝鲜红,并无异样。

  6、肌肉:部分病鱼肌肉有白色结节。

  7、内脏:部分病鱼有大量腹水;多数病鱼的肝脏、脾脏、肾脏、心脏、鳔腔表面等有白色结节,部分病鱼肠系膜也有白色结节;部分病鱼在后肾处形成巨大的囊肿物。

  四、诊断要点

  正确诊断诺卡氏菌病,就要对诺卡氏菌病的症状有深刻、全面的认识,并能灵活应用光学显微镜,必要时借助实验室设备。


  需要指出,随着养殖环境的日益恶化以及盲目用药,加州鲈诺卡氏菌病出现越来越多的新症状,在一线诊断时,应仔细、全面观察病症,并结合显微镜观察情况综合诊断,必要时联系实验室协助确诊。

  此外,朝苗阶段应注意肝脏白斑与诺卡氏菌病白色结节的区别:

  1、前者仅限于肝脏,内脏分离培养不到致病菌;

  2、后者症状较多,结节分布广泛,内脏可分离培养到诺卡氏菌。

  养殖中后期注意爱德华氏菌病与诺卡氏菌病的区别:

  1、前者结节仅限于脾脏,肾脏常见整体肿大,镜检有时也可见结节,致病菌在脑心浸液培养基上生长相对较快,圆形,湿润,边缘整齐;

  2、后者结节分布广泛,致病菌在脑心浸液培养基上生长缓慢,沙粒状,粗糙,镜检呈山丘状,边缘不规则。

  五、预防方法

  广义上,可借鉴鱼病的三环理论,从改善水体环境、消灭病原菌、增强鱼体体质和抗病力着手。

  1、改善水体环境。如合理使用微生态制剂,使水质清爽,确保溶氧充足,为加州鲈营造优良的水环境;

  2、消灭病原菌。如弃投冰鲜,切断食源病原菌,定期使用全效底改、底毒净等进行改底,减少底部致病菌数量;

  3、增强鱼体体质和抗病力。投喂优质饲料,或定期内服护肝产品等增强体质,提高免疫力。

  具体可结合病原菌的生物学特性(弱抗酸性)以及经验(杀虫、换水或过度投喂等节点后发病率极高),从以下三个关键点预防诺卡氏菌病。

  1、合理调控pH,维持弱碱性(以下午pH8.3左右为宜)

  鰤鱼诺卡氏菌具有弱抗酸性,在弱酸水体更容易获得生态优势。到了养殖的中后期阶段,由于池塘底部积累了大量的鱼类粪便等有机物,这些有机物在缺氧状态下发酵产生酸性物质,加之池塘生物量大,呼吸作用强,池塘的水体和底泥往往偏酸,必需人为进行调控。调控pH的药物有石灰、小苏打(碳酸氢钠)、有益菌等,具体方案应在专业人士的指导下使用。

  2、谨慎杀虫或换水

  鰤鱼诺卡氏菌是一种条件致病菌,在自然水体、底泥中广泛存在。根据我们从一线收集到的信息,杀虫、换水等节点后诺卡氏菌病的发病率明显高于平时。其中缘由,杀虫或换水会引起水质突变和鱼体应激,造成鱼体免疫力下降,给病原菌的入侵或潜伏鱼体内的病原菌的大量繁殖带来可乘之机。

  另一方面,据我们检测,加州鲈养殖中后期阶段直接由寄生虫引起的病害较为罕见,尽管常能检测到寄生虫,但一般数量不多,绝大多数都有更重要的病因。因此,杀虫务必谨慎,避免盲目杀虫,如一定要杀虫,也务必选择在天气稳定时并在专业人士的指导下进行。

  3、选好饲料,科学投喂,切忌过度投喂

  鰤鱼诺卡氏菌以腐生为主,在腐败变质的冰鲜杂鱼中容易大量繁殖。要预防诺卡氏菌病,首先要选用不带病原菌的优质配合饲料,切断感染的食源途径;其次,加州鲈摄食易受天气、光照等影响,波动幅度较大,在投喂过程中应坚持定质定量的原则,维持相对稳定的投喂量,切忌过饱投喂。否则,一旦摄食过饱,加州鲈消化不良,体质亚健康,免疫力下降,很容易感染、爆发诺卡氏菌病。

  此外,据相关研究,回归感染试验,腹腔注射感染1周后即出现死亡病例,而口灌及浸泡感染约2周后才出现死鱼,这表明鰤鱼诺卡氏菌是一种慢性致病菌。因此,平时巡塘和投喂时应注意观察鱼群状态和体表特征,一旦遇到游边、迟钝的病鱼,应仔细、全面检查有无诺卡氏菌病症状,及时发现,及时治疗。

  六、治疗方案

  在农业部公布的10种抗微生物渔药中,强力霉素和氟苯尼考对诺卡氏菌的抑杀作用相对较好,但由于诺卡氏菌损伤免疫器官和药物难以渗透肉芽肿组织触杀病原菌等原因,治疗仅在感染初期有良好效果。

  补充说明,部分养殖户反映,内服驱杀孢子虫药——盐酸氯苯胍有一定效果,能控制病情,具体机理不详。

  七、梁工点评—加州鲈诺卡氏菌病

  图1:示诺卡氏菌病-体表完好

  点评1:部分二龄病鱼体表无任何异状

  图2:示诺卡氏菌病-体表斑点状溃疡、出血和眼睛肿大、凸起

  点评2:体表斑点状出血是加州鲈诺卡氏菌病的典型症状之一,由于与教科书上的钉虫病高度相似,容易被误诊为钉虫病。实际上,加州鲈被钉虫咬伤的地方很少呈鲜红色。

  多种病因可致加州鲈眼睛肿大、凸起,诺卡氏菌病是其中之一,需取眼睛内积液镜检(400X)即可确诊。

  图3:示诺卡氏菌病-体表浓疮

  点评3:加州鲈体表浓疮由细菌感染引起,而且多数都是诺卡氏菌引起(脓液较粘稠),但也有部分由非诺卡氏菌引起(脓液较稀),取脓液镜检(400X)即可区分。

  图4:示诺卡氏菌病-体表浅表性溃疡、创面鲜红

  点评4:属虹彩病毒也可致类似的浅表性溃烂,但一般创面苍白,且镜检(400X)无诺卡氏菌菌丝。

  图5:示诺卡氏菌病-鳃白色结节

  点评5:目前,据我们的检测和相关文献,加州鲈鳃结节的病原仅有诺卡氏菌一种,鳃白色结节可作为判断诺卡氏菌病的特征性症状;当然,极个别结节的除外。

  图6:示诺卡氏菌病-口腔溃疡灶

  点评6:偶见部分加州鲈病鱼口腔出现溃疡斑,取其中粘液镜检(400X)可见大量交错成团的、细长的、分枝的诺卡氏菌菌丝。但由于不常见,在遇到类似症状时需全面检测才能确诊。

  图7:示诺卡氏菌病-皮下白色结节

  点评7:加州鲈病鱼体表有浓疮,剪开可见白色脓浆,镜检(400X)可见大量诺卡氏菌菌丝。与孢子虫囊孢较为相似,容易误诊。另,曾有学者报道加州鲈消化系统感染孢子虫的病例,但据我们和同行检测,加州鲈肌肉、肝脾肾等内脏部位均未明确检出过孢子虫。

  图8:示诺卡氏菌病-肌肉白色结节

  点评8:常见加州鲈肌肉结节,且全部可观察或分离到诺卡氏菌,此症状可作为判断诺卡氏菌病的特征性症状。

  图9:示诺卡氏菌病-内脏无结节

  点评9:有时,受药物等的影响,部分诺卡氏菌病病鱼内脏并无结节,仅表现为浅表性溃疡。此类病鱼在长期用药的池塘中常见。

  图10:示诺卡氏菌病-后肾表面白色结节

  点评10:常见症状,但有时也可见后肾表面附着一些黄色增生物,此类增生物为坏死的细胞,检测不到疑似致病菌,镜检(400X)即可区分。

  图11:示诺卡氏菌病-后肾巨大囊肿物

  点评11:后期常见症状,但其它一些致病菌如爱德华氏菌也可导致后肾肿大,与诺卡氏菌囊肿物较为相似,镜检(400X)即可区分。

  图12:示诺卡氏菌病-头肾大量白色结节

  点评12:加州鲈感染诺卡氏菌,首先头肾会出现结节(镜检头肾有无结节可作为早期诊断手段之一),但是需要指出,爱德华氏菌等也会导致类似的结节,诊断时应予以注意区分。

  图13:示诺卡氏菌病-肝脏大量白色结节

  点评13:肝脏白色结节也是诺卡氏菌病的典型症状之一,但值得指出,苗期阶段(全长8——15cm)加州鲈也常见肝脏白斑,而此类病鱼普遍虹彩病毒阳性但检测不到疑似致病菌。

  图14:示诺卡氏菌病-脾脏大量白色结节

  点评14:脾脏出现白色结节是加州鲈诺卡氏菌病的典型症状之一,但是加州鲈感染爱德华氏菌病后也会出现脾脏结节,区别在于后者的白色结节仅限于脾脏和肾脏,而其他部位无。

  图15:示诺卡氏菌病-内脏大量白色结节

  点评15:严重感染诺卡氏菌病的加州鲈,肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肠系膜、鳔腔等均会出现白色结节,而其他病害的结节一般限于肝脏或脾肾等个别器官,这也可以作为判断诺卡氏菌病的特征性症状。

  图16:示诺卡氏菌病-心脏大量白色结节

  点评16:感染诺卡氏菌病的加州鲈心脏表面也可出现大量白色结节,但某些亚健康的加州鲈心脏表面会出现个别脂肪粒,诊断时应注意予以区别。

  图17:加州鲈诺卡氏菌病-病灶大量诺卡氏菌丝(400X)

  点评17:鰤鱼诺卡氏菌菌丝细长、分枝,相互交错,结团生长,光学显微镜(400X)下特征非常明显,与其它致病菌有显著的区别。在诊断加州鲈诺卡氏菌病时,应充分利用光学显微镜,取病灶组织制成薄涂片观察,以提高正确诊断率。

  图18:加州鲈诺卡氏菌病-病灶大量诺卡氏菌丝,呈细长、分枝状,革兰氏染色阳性(400X)

  点评18:据现有文献资料和我们实验室检测,危害加州鲈的致病菌中,属于革兰氏阳性菌的仅有鰤鱼诺卡氏菌。结合革兰氏染色,可进一步确诊加州鲈诺卡氏菌病。但应注意革兰氏染色假阳性现象。

  图19:加州鲈诺卡氏菌病-病灶大量诺卡氏菌丝,呈细长、分枝状,革兰氏染色阳性(400X)

  图20:鰤鱼诺卡氏菌在脑心浸液培养基上的菌落形态

  点评20:鰤鱼诺卡氏菌的生长速度偏慢,在脑心浸液琼脂培养基上的菌落特征非常明显,呈砂粒状、粗糙、边缘不规则,可作为判断诺卡氏菌病的特征之一。

  图21:鰤鱼诺卡氏菌在脑心浸液培养基上的菌落形态(40X)

  点评21:光学显微镜下(40X),鰤鱼诺卡氏菌呈棕灰色,山丘状,边缘不整齐,与其他山东11选5致病菌菌落的差异非常大,也可作为确诊诺卡氏菌病的特征性依据。

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